豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術(shù)原理
點擊次數(shù):775 更新時間:2020-09-10
豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術(shù)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)水平。用純化的豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4),再與HRP標記的單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)濃度。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實際濃度。